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三磷酸腺苷ATP含量測定試劑盒真的太棒了!

更新時間:2018-03-13      瀏覽次數:1282

三磷酸腺苷ATP含量測定試劑盒真的太棒了!

產品說明:

三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物體內能量轉換zui基本的載體, 其含量的變 化直接關系到各器官的能量代謝。ATP 作為zui重要的能量分子在細胞的各種生理、病理過程中起著 重要作用。ATP 水平的改變,會影響許多細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態 下,ATP 水平會下降,而高葡萄糖刺激等對于一些細胞可以上調細胞內 ATP 水平。通常 ATP 水平 的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細胞凋亡時 ATP 水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同 時發生狀態。ATP 含量測定試劑盒可以用于檢測紅細胞或組織內的 ATP 水平。

分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、臺式離心機、研缽和蒸餾水。

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一、樣本前處理:

1、紅細胞:抗凝全血取下層積壓紅細胞,一般按 1:4 的體積比加雙蒸水進行稀釋,再混勻使溶血*,制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮 10 分鐘,取出混勻抽提 1 分鐘, 4000 轉/分鐘,離心 10 分鐘,取上清液待測。

2、組織樣本:準確稱取組織重,按質量(g):體積(mL)為 1:9 的比例加入 9 倍體積的沸雙蒸水, 制成 10%的勻漿液,再置于沸水中煮 10min,取出混勻抽提 1min,3500 轉/分鐘,離心 10min, 取上清液待測。

3、培養細胞:先離心處理將細胞核培養上清分離,棄上清,得到下層沉淀細胞(一般細胞數量達 到 106 個),將收集好的細胞加入 300-500μL 的熱雙蒸水,置于熱水浴(90-100℃)中勻漿破碎 后,將細胞懸液于沸水浴中加熱 10min,取出混勻抽提 1min(渦旋混勻),即可用于測定。(如 果存在大塊細胞碎片,需離心后取上清測定) 

注意:

1.要求不能有任何磷污染,建議用一次性塑料試管。

2.顯色應用液配好后,不可放置太久,一般可保存 5 天,現配現用。

3.組織勻漿宜用 2%-5%濃度的勻漿上清,若樣本濃度過高,則底色過深(對照管 OD 過高),需稀釋 測定,一般通過預實驗將對照 OD 值控制在 1.0 以下。

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