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產(chǎn)品上新-人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞

更新時(shí)間:2023-05-05      瀏覽次數(shù):1260

產(chǎn)品上新-人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞


培養(yǎng)基 DMEM-H完全培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS 


傳代方法 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。


細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 


生長條件 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; 

生長特性 貼壁生長 

存儲(chǔ)條件 液氮 

類型 貼壁生長 

安全等級(jí) 1 

形態(tài) 上皮細(xì)胞樣,多角形,不規(guī)則形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈,不產(chǎn)色素 


細(xì)胞壁 分類在細(xì)菌、真菌、植物的生物,其組成的細(xì)胞都具有細(xì)胞壁(Cell Wall),而原生生物則有一部分的生物體具有此構(gòu)造,但是動(dòng)物沒有。 植物細(xì)胞壁主要成分是纖維素,經(jīng)過有系統(tǒng)的編織形成網(wǎng)狀的外壁。可分為中膠層、初生細(xì)胞壁、次生細(xì)胞壁。中膠層是植物細(xì)胞剛分裂完成的子細(xì)胞之間,最先形成的間隔,主要成分是果膠質(zhì)(一種多糖類),隨后在中膠層兩側(cè)形成初生細(xì)胞壁,初生細(xì)胞壁主要由果膠質(zhì)、木質(zhì)素和少量的蛋白質(zhì)構(gòu)成。次生細(xì)胞壁主要由纖維素組成的纖維排列而成,如同一條一條的線以接近直角的方式排列,再以木質(zhì)素等多糖類黏接。 真菌細(xì)胞壁則是由幾丁質(zhì)、纖維素等多糖類組成,其中幾丁質(zhì)是含有碳水化合物和氨,性柔軟,有彈性,與鈣鹽混雜則硬化,形成節(jié)肢動(dòng)物的外骨骼。幾丁質(zhì)不溶于水、酒精、弱酸和弱堿等液體,有保護(hù)功能。 細(xì)菌細(xì)胞壁組成以肽聚糖為主。 

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