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小鼠白細胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒使用注意事項

更新時間:2023-06-26      瀏覽次數:1348

小鼠白細胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒使用注意事項


試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠白細胞介素4(IL-4)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并撤底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細胞介素4(IL-4)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
產品名稱: 小鼠白細胞介素4(IL-4)ELISA檢測試劑盒


產品規格:96T
儲存條件: 2-8℃,避光防潮保存
有效期:6個月
本產品僅供科研實驗用,不做其它用途!


實驗步驟(僅供參考):

1.  從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4.  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


注意事項:
1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶玩全溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.  預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.  所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒性能:
<spantext-align: justify;="" line-height:="" 150%;"="">準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2.  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4.重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%。


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